2014/06/12

蔭山 俊・小松雅明
（新潟大学大学院医歯学総合研究科 分子生物学）
email：小松雅明
領域融合レビュー, 3, e006 (2014)　DOI: 10.7875/leading.author.3.e006
Shun Kageyama & Masaaki Komatsu: Autophagy and disease states.

要 約

　オートファジー関連遺伝子が同定されて以来，さまざまなモデル動物においてオートファジー関連遺伝子の改変動物が作出され，オートファジーの生理機能，とくに，アミノ酸プールの維持や細胞の新陳代謝としての機能が明確になった．また，さまざまな臓器に特異的なオートファジー関連遺伝子の改変マウスが，変性タンパク質そして異常なオルガネラの蓄積をともなう神経変性疾患，肝障害，がんなど重篤な疾患を呈することが明らかになり，オートファジーによる細胞保護の作用が決定的になった．さらに，細胞に侵入した細菌や異常なオルガネラ，とくに変性ミトコンドリアのオートファジーによる選択的な除去機構が明らかにされ，その病態生理的な役割は複雑さを増している．そしてごく最近，ヒトにおいてもオートファジー関連遺伝子の変異が神経変性疾患や炎症性疾患をひき起こすことが発見され，オートファジーの異常がヒトの疾患にも直接に関与することが判明した．このレビューではオートファジーを概説するとともに，オートファジー関連遺伝子の変異により起こる遺伝性疾患，オートファジーの異常が複雑に関与するがんをとりあげる．

はじめに

　オートファジーはリソソームにおいて細胞質の成分を分解する機構である．オートファジーにはミクロオートファジー，シャペロン介在性オートファジー，マクロオートファジーの3つの経路がある．これらのなかで，マクロオートファジーの解析がもっとも進んでおり，たんに“オートファジー”と表記した場合にはマクロオートファジーをさすことが多く，このレビューにおいてもこれにしたがう．オートファジーは細胞質に出現した隔離膜が細胞質の成分を取り囲みオートファゴソームが形成される過程と，オートファゴソームがリソソームと融合し細胞質の成分を分解する過程からなる．小胞体，ミトコンドリア，ゴルジ体，細胞膜，さらには，リサイクリングエンドソームに由来する多彩な膜成分がオートファゴソーム膜の形成に寄与しており，その形成から内容物の分解までは，オートファジー関連遺伝子（autophagy-related gene：ATG）にコードされるAtgタンパク質により厳密に制御されている．
　オートファゴソームの形成に特化したコアAtgタンパク質は，以下の6つの機能単位に分類される．1）ULK1キナーゼ複合体（ULK1，ULK2，Atg13，FIP200，Atg101），2）クラスIIIホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI3キナーゼ）複合体（Vps34，Vps15，Beclin 1，Atg14(L)/Barkor），3）ホスファチジルイノシトール-1,4,5-トリスリン酸（PI3P）結合タンパク質（Atg2，WIPI1～WIPI4），4）膜タンパク質（Atg9L1），5）Atg12共有結合系（Atg12，Atg7，Atg10，Atg5，Atg16L1，Atg16L2），6）LC3共有結合系（LC3A～LC3C，GABARAP，GABARAPL1，GABARAPL2，Atg4A～Atg4D，Atg7，Atg3）．これらコアAtgタンパク質の機能単位が連続的かつ協調的に作動することによりオートファゴソームは形成される¹⁾（図1）．



　なお，出芽酵母におけるオートファジーの研究については，荒木保弘・大隅良典, 領域融合レビュー, 1, e005, 2012 も参照されたい．

1．オートファジーの活性化および抑制の機構

　オートファジーはおもにインスリンシグナルおよびアミノ酸シグナルに応じたmTOR複合体1の活性化により抑制される^2-4)．インスリンシグナルはクラスI PI3キナーゼ-AKT経路を活性化し，TSC2をリン酸化することによりその活性を抑制する．TSC2はGTPase活性化タンパク質（GTPase activating protein：GAP）として低分子量Gタンパク質であるRhebの活性を負に制御する^5-8)．したがって，AKTによるTSC2の抑制はmTOR複合体1の活性化を促進する（図2）．一方，アミノ酸シグナル（とくに，ロイシンおよびグルタミン）により低分子量Gタンパク質であるRagがGDP結合型からGTP結合型へと変換されると，RagはmTOR複合体1の構成タンパク質であるRaptorと結合する．さらに，Ragはリソソーム膜に局在するRagulatorとよばれる複合体と相互作用することによりmTOR複合体1をリソソーム膜につなぎとめる．最終的に，リソソーム膜に存在するRhebとmTOR複合体1とが会合することによりmTOR複合体1の活性化が促進される^9-11)．ロイシルtRNAシンテターゼはRagのGTPase活性化タンパク質として機能し，ロイシンに誘導されるmTOR複合体1の活性化に寄与する．グルタミンはグルタミナーゼによりグルタミン酸に変換され，さらに，グルタミン酸デヒドロゲナーゼによる脱アミノ化によりαケトグルタル酸とアンモニアになる．αケトグルタル酸はRagのGTP結合型への変換を促進しmTOR複合体1を活性化する^12-14)．このとき，ロイシンはグルタミン酸デヒドロゲナーゼをアロステリックに活性化している．他方，リソソームに存在するアミノ酸はリソソーム膜に局在するV型ATPaseが感知し，V型ATPaseとRagulatorとの会合あるいは解離を制御することによりmTOR複合体1の活性を制御する^15,16)．活性化したmTOR複合体1はULK1キナーゼ複合体と相互作用し，ULK1およびAtg13がリン酸化されオートファジーは抑制される¹⁷⁾（図2）．すなわち，インスリンあるいはアミノ酸が欠乏するとオートファジーは容易に惹起される（図2）．骨格筋ではインスリンにより，一方，肝臓ではアミノ酸によりオートファジーが抑制されており，生体においてオートファジーはmTOR複合体1により組織ごとに異なった分子機構により制御されている¹⁸⁾．グルコースが欠乏するとATPが減少してAMP/ATP比が上昇し，その結果，AMPKが活性化する．AMPKはRaptorのリン酸化あるいはTSC2のリン酸化を介してmTOR複合体1を不活性化させオートファジーを誘導する^19,20)．また，AMPKはULK1およびBeclin 1を直接にリン酸化し活性化する^21,22)．したがって，AMPKはmTOR複合体1に依存的にも非依存的にオートファジーを活性化しうる（図2）．

2．オートファジーの生理機能

　オートファジーのもっとも基本的な生理機能は，飢餓への適応である（図3a）．すでに述べたとおり，オートファジーは低アミノ酸状態あるいは低インスリン状態において一過的に誘導され細胞質の成分を分解する．糖や脂質と異なりアミノ酸プールはわずかであり（ヒトの成人の場合，タンパク質生合成に必要なアミノ酸量は1日あたり300～400 gであるのに対し，アミノ酸プールは約100 gしかない），飢餓に応答したオートファジーによるアミノ酸の供給が重要であることは容易に想像できる．たとえば，マウスの新生仔は胎盤からの栄養の供給が絶たれる出生の直後に一過的にオートファジーを誘導しアミノ酸プールを維持する．全身においてAtg5遺伝子を欠損させたマウスは出生の直後の飢餓の際に組織および血中において重篤な低アミノ酸症状におちいり，それが一因となり出生から24時間以内に死亡する²³⁾．では，オートファジーにより生じたアミノ酸はどうなるのだろうか？　出芽酵母のオートファジー不能変異体は飢餓の際にミトコンドリア呼吸鎖タンパク質や抗酸化タンパク質の生合成の不全をひき起こすことから，第1に，飢餓に応答した特定のタンパク質の生合成のために利用されると考えられる．また，アミノ酸はアミノ基転移反応やアミノ酸代謝によりピルビン酸，TCA回路中間体，アセチルCoAとなる．アミノ酸はこの補充反応経路により糖新生，脂肪酸生合成，エネルギー産生に寄与する．実際に，肝臓に特異的なAtg7ノックアウトマウスの解析から，オートファジーにより生じたアミノ酸は糖新生に利用されることが明らかになっている²⁴⁾．がん細胞ではオートファジーに依存したアミノ酸およびTCA回路中間体の供給がその生存に重要らしい²⁵⁾．また，Atg5ノックアウトマウスにおいてはAMPKが活性化されており，糖新生が阻害されていることが示唆される²³⁾．受精の直後にもオートファジーは活性化され，母方に由来するタンパク質を分解し，胚の初期発生に必要なタンパク質の生合成のためのアミノ酸を供給する²⁶⁾．このようなオートファジーは，細胞質の成分を非選択的かつ大量にオートファゴソームに取り込んで分解するという特徴をもっている．



　栄養が十分に存在する場合でも，基底レベルでの恒常的なオートファジーは起こっている（図3b）．この恒常的なオートファジーの活性は低いレベルではあるが，細胞質のオルガネラやタンパク質の新陳代謝を担う．事実，一連の組織に特異的なオートファジー欠損マウスの解析により，障害をうけたミトコンドリアをはじめとした異常なオルガネラやユビキチンに陽性のタンパク質凝集体の蓄積がオートファジーの抑制により促進され，多様かつ重篤な疾患がひき起こされることが示された．オートファジーは細胞質のオルガネラやタンパク質を無作為に取り囲んだオートファゴソームがリソソームと融合して起こる非選択的な分解系と想定されてきたが，1990年代後半から2000年代前半，出芽酵母やメタノール資化性酵母を用いた解析から，それぞれ，アミノペプチダーゼ複合体やペルオキシソームがオートファジーの分子機構に依存して選択的に液胞（酵母において，リソソームに相当するオルガネラ）に輸送されていることが明らかになった^27,28)．2004年には，細胞に侵入したA型連鎖球菌がオートファゴソームに選択的に取り込まれリソソームにおいて殺菌されることが報告された²⁹⁾．2005年には，ユビキチンおよびLC3結合タンパク質SQSTM1/p62を介したオートファジーによるユビキチン化したタンパク質凝集体の排除機構が提唱された³⁰⁾．時期を同じくして，オートファジー欠損マウスの組織における共通の特徴として，Sqstm1/p62がいちじるしく蓄積し，ユビキチン陽性およびSqstm1/p62陽性のタンパク質凝集体が形成されていることが判明した³¹⁾．また2009年には，出芽酵母においてミトコンドリアに対する選択的なオートファジーに必須のタンパク質としてAtg32が発見された³²⁾．さらに，若年性パーキンソン病の原因遺伝子にコードされるユビキチンリガーゼParkinによるミトコンドリア外膜タンパク質のユビキチン化が，オートファジーによる変性ミトコンドリアの除去を惹起することが報告されている³³⁾．これらの選択的オートファジーは細胞のストレスに応じて誘導的に起こる．この数年のあいだに，選択的オートファジーの異常はパーキンソン病，感染症，がんの発症に密接に関与することが明らかになってきた（図3b）．

3．オートファジーと疾患

　オートファジー関連遺伝子や選択的オートファジーに関与する遺伝子の変異により起こる遺伝性疾患，クローン病，パーキンソン病，SENDA病，Vici症候群，そして，がんについて述べる（表1）．



　クローン病は，消化管に重篤な炎症あるいは潰瘍をひき起こす原因不明の炎症性腸疾患である．クローン病の発症には，病原体の感染，自然免疫の異常，食物の成分による腸管粘膜の異常など，複雑な環境要因がからんでいると想定されている．2007年，コアAtgタンパク質をコードする遺伝子のひとつATG16L1遺伝子の非同義置換にクローン病との強い相関のあることが報告された^34,35)．ATG16L1はN末端側にコイルドコイル領域，中央からC末端にWDリピートをもつ．ATG12-ATG5複合体と相互作用して3者複合体を形成し，LC3共有結合系においてユビキチンリガーゼ様タンパク質として機能する³⁶⁾．見い出された非同義置換はWDリピートのN末端側に位置していた．このWDリピートは出芽酵母のATG16には存在せず，少なくとも，マウスの線維芽細胞ではオートファジーの活性に影響をあたえないことが報告されていた^37,38)．しかしごく最近，飢餓などの代謝ストレスのもとではこの変異型Atg16L1はカスパーゼ3による切断を容易にうけ，オートファジーの活性が減弱することが報告された．変異型Atg16ノックインマウスに腸内細菌のひとつであるYersinia属細菌を感染させると，オートファジーによる細菌の排除が行われず，炎症性サイトカインの放出が増加する³⁹⁾．このほかにも，Atg16L1を欠損したマクロファージはグラム陰性細菌に応答して過剰なインターロイキン1βおよびインターロイキン18を産生し強い炎症反応をひき起こすこと，Atg16L1を低発現するマウスでは抗菌ペプチドなどを分泌する小腸のPaneth細胞において分泌顆粒の形成不全および分泌異常が認められること，オートファジーと小胞体ストレス応答の両方を阻害することによりはじめて腸炎がひき起こされることなど，クローン病の発症にオートファジーの異常が関与するとする報告が蓄積しつつある^40-42)．
　パーキンソン病は，神経伝達物質であるドーパミンを産生する中脳黒質のドーパミンニューロンの変性および脱落にともなう，線条体におけるドーパミンの含有量の減少に起因する．線条体におけるドーパミンの減少は大脳皮質前頭葉の運動野と大脳基底核をめぐるループ回路の機能失調をひき起こし，無動，固縮，振戦などの重篤な運動障害を発症する．パーキンソン病の大部分は弧発性であるが，特定の遺伝子変異に起因する家族性パーキンソン病もある．常染色体劣性遺伝性パーキンソン病の原因遺伝子であるPARK2遺伝子にコードされるユビキチンリガーゼParkinが，変性したミトコンドリアに転移しミトコンドリア外膜タンパク質をユビキチン化すると，それが引き金となりオートファジーによる異常なミトコンドリアの選択的な排除（マイトファジー）の惹起されることが報告された³³⁾（図3b）．このParkinのミトコンドリアへの局在は，常染色体劣性遺伝性パーキンソン病の別の原因遺伝子であるPARK6遺伝子にコードされるPINK1に依存する^43-47)．ミトコンドリア局在シグナルおよび膜貫通領域をもつセリン-スレオニンキナーゼであるPINK1は，通常はミトコンドリア内膜に存在するプロテアーゼPARLにより切断されプロテアソームにより分解される^48,49)．一方，膜電位を消失したミトコンドリアではPINK1はミトコンドリア外膜にとどまる．その結果，PINK1は自己リン酸化に依存してParkinをミトコンドリアへとリクルートする⁵⁰⁾．さらにごく最近，PINK1がユビキチンをリン酸化し，このユビキチンのリン酸化がParkinの活性化に不可欠であることが判明した⁵¹⁾（新着論文レビュー でも掲載）．パーキンソン病の患者に由来する変異をもつParkinおよびPINK1はこれらの過程に異常を示す⁴⁵⁾．したがって，PINK-Parkin経路を介したマイトファジーの異常が活性酸素種の蓄積をひき起こし，ドーパミンニューロンが損傷してパーキンソン病の発症にいたると想定される．この仮説を支持するように，ミトコンドリアの異常とパーキンソン病との関連性は古くから報告されてきた．たとえば，パーキンソン病の患者において，ミトコンドリアDNAの欠失，呼吸活性の低下したミトコンドリアの蓄積，それにともなう活性酸素種の増加が確認されている．一方，PINK-Parkin経路はマイトファジーの誘導ではなく，おもにプロテアソームによるミトコンドリア外膜タンパク質の分解（ミトコンドリア外膜タンパク質の品質管理）に機能するとも考えられている⁵²⁾．PINK-Parkin経路が精力的に研究される一方，ミトコンドリアの分解までフォローした研究は少なく，今後の詳細な研究が必要と思われる．
　SENDA病は，脳の黒質および淡蒼球における鉄の沈着と大脳の萎縮をともなう神経変性疾患である（SENDA：static encephalopathy of childhood with neurodegeneration in adulthood）．最近，SENDA病の患者のエクソーム解析から，出芽酵母のオートファジー関連遺伝子であるATG18遺伝子のヒトにおける4つのホモログ（WIPI1遺伝子～WIPI4遺伝子）のひとつであるWDR45/WIPI4遺伝子に新規の変異が同定された^53,54)（文献⁵⁴⁾ は，新着論文レビュー でも掲載）．出芽酵母ATG18はPROPPINファミリーのひとつでβプロペラ構造をもつWD40ドメインを含み，ホスファチジルイノシトール-1,4,5-トリスリン酸（PI3P）およびリソソームに局在するホスファチジルイノシトール-3,5-ビスリン酸と結合する^55-57)．ATG18には2つのホスファチジルイノシトール結合部位が存在し，PI3キナーゼにより産生されたPI3Pに依存してオートファゴソームの形成される位置にリクルートされる^58-61)．SENDA病の患者から単離されたリンパ芽球様細胞株においてWDR45/WIPI4が顕著に減少しており，オートファゴソームの形成に関与するAtg9L1およびLC3の異常な蓄積（オートファゴソーム中間体の蓄積），および，オートファジーの活性の低下が確認された⁵⁴⁾．このことは，コアAtgタンパク質をコードするWDR45/WIPI4遺伝子における変異が神経変性疾患の発症因子となっていることを意味するが，オートファジーの障害がどのようにして鉄の沈着をひき起こすのか，なぜニューロンのみで影響が認められるかは不明であり，さらなる解析が必要である．WDR45/WIPI4遺伝子はX染色体に位置しており，X染色体の不活性化により女性のSENDA病の患者はWDR45/WIPI4の機能をモザイク状に失っている．男性ではWDR45/WIPI4は完全に欠損しているが，少数の男性例が報告されている^53,62)．WDR45/WIPI4の機能の欠損はWIPI1～WIPI3によりある程度は補完されると考えられ，わずかなオートファジーの活性の減弱が病態の発症に十分であることが示唆される．
　Vici症候群は，劣性遺伝性の多系統疾患であり，脳梁の形成不全，白内障，心筋症，複合免疫不全，色素沈着の減少を特徴とする．Vici症候群の患者のエクソーム解析により，EPG5遺伝子に複数の変異を同定された⁶³⁾．EPG5遺伝子は線虫においてオートファジーの基質の分解阻害を指標としたスクリーニングにより後生動物に特異的なオートファジー関連遺伝子として同定された⁶⁴⁾．哺乳類細胞においてEPG5遺伝子をノックダウンすると電子密度の高いオートリソソームが長時間にわたり蓄積することから，EPG5はオートリソソームの成熟に関与すると考えられる⁶⁵⁾．実際に，Vici症候群の患者に由来する線維芽細胞および筋肉ではオートファジーの活性の低下とともに，オートファジーの選択的な基質であるSQSTM1/p62およびNBR1の蓄積が確認される．興味深いことに，Vici症候群の患者に由来する線維芽細胞ではオートファゴソームの形成を制御するAKTやFOXO3などの上流タンパク質も影響をうけていた⁶³⁾．したがって，Vici症候群ではオートファジーのさまざまなステップが影響をうけている可能性がある．さらに，EPG5ノックアウトマウスには大脳皮質の内錐体ニューロン層および脊髄の運動ニューロンに特異的な障害が確認され，筋肉の除神経，筋繊維の萎縮，生存率の低下，筋萎縮性側索硬化症様の症状を示す．EPG5遺伝子を欠損したマウスのニューロンおよびグリア細胞ではSqstm1/p62陽性タンパク質およびユビキチン化タンパク質も蓄積しており，オートファジーの活性の低下が認められた⁶⁵⁾．これらの事実は，EPG5遺伝子の変異によるVici症候群の発症にオートファジーの不全が関与することを強く示唆する．

4．オートファジーとがん

　オートファジーはインスリンシグナル伝達経路およびアミノ酸シグナル伝達経路の下流に位置するmTOR複合体1により負に制御されている（図2）．インスリンシグナル伝達系に関与するがん遺伝子あるいはがん抑制遺伝子の変異はインスリンシグナルの恒常的な活性化をひき起こすことから，がん細胞におけるオートファジーの抑制が示唆されてきた．しかし，mTOR複合体1は多様な細胞機能を制御しているため，mTOR複合体1の活性化によるオートファジーの抑制がどこまで腫瘍の形成にかかわっているかは不明であった．1999年に，出芽酵母ATG6/VPS30遺伝子の高等動物におけるホモログであるBECN1遺伝子ががん抑制遺伝子であることが報告された⁶⁶⁾．BECN1はヒトの乳がんなどにおいて発現が低下しており，さらに，Becn1ヘテロノックアウトマウスではさまざまな腫瘍が自然発生することから，オートファジーは腫瘍の形成を抑制していると考えられてきた⁶⁶⁾．しかし，BECN1遺伝子のコードするBeclin 1はオートファジーだけではなくエンドサイトーシスにも関与する多機能タンパク質であるため，Becn1ヘテロノックアウトマウスを用いた実験の結果が真にオートファジー不全の表現型を示しているのか疑問が残っていた．
　2011年に，オートファジーに特化した遺伝子改変マウスが腫瘍を形成することが判明し，腫瘍の抑制がオートファジーの生理的な意義のひとつとして確固たるものになった．Atg5遺伝子を全身においてモザイク状に欠損させたマウスは，生後約7カ月で肝臓に小さな腫瘍が観察され，加齢とともに腫瘍の大きさおよび数は増加し，約16カ月齢において肝臓は腫瘍によりしめられた^67,68)．興味深いことに，このモザイクマウスは全身においてAtg5遺伝子を欠損しているにもかかわらず，肝臓にのみ腫瘍が形成された⁶⁸⁾．ほぼ同様の結果が，肝臓に特異的なAtg7ノックアウトマウスにおいても観察されている⁶⁷⁾．注目すべき点として，Becn1ヘテロノックアウトマウスとは異なり，Atg5遺伝子あるいはAtg7遺伝子の欠損により形成された肝臓の腫瘍細胞には核の異数性がなく，発生部位に限局してモノクローナルに増殖し規則的な配列や増殖パターンを形成する良性の腫瘍であり，ほかの臓器への転移も確認されなかった^67,68)．Atg5遺伝子あるいはAtg7遺伝子を欠損した肝実質細胞において，膨化したミトコンドリアやペルオキシソームの蓄積，DNAの酸化損傷やゲノムの不安定性が認められる^67,68)．一定に保たれるべきペルオキシソームや機能不全におちいったミトコンドリアがオートファジーにより分解されないために細胞に蓄積し，その結果として活性酸素種が過剰に生じ，ついでDNA損傷が誘発され腫瘍の形成を促進している可能性がある．
　Sqstm1/p62も腫瘍化および腫瘍の進行に関与する．Sqstm1/p62はオートファゴソームに局在するタンパク質であるLC3に結合するタンパク質であり，オートファジーにより恒常的に分解されている³⁰⁾．したがって，オートファジーを欠損した組織において顕著に蓄積する．ごく最近，腎細胞がんの患者の5％においてSQSTM1/p62遺伝子を含む領域が遺伝子重複していること，SQSTM1/p62の発現上昇が腫瘍の形成と相関することが報告された⁶⁹⁾．つまり，SQSTM1/p62はがん遺伝子であった．SQSTM1/p62は腫瘍化あるいは腫瘍の進行にどのように関与するのだろうか？　Sqstm1/p62は複数のシグナル伝達タンパク質と相互作用するスカフォールドタンパク質であり，TRAF6との結合を介したNF-κBシグナルの活性化やユビキチン化したカスパーゼ-8との相互作用を介したアポトーシスの促進など細胞の生死を制御している⁷⁰⁾．NF-κBシグナルの活性化は腫瘍の形成に関与することから，Sqstm1/p62の蓄積によるNF-κBシグナルの恒常的な活性化が腫瘍の形成の要因としてあげられる．事実，SQSTM1/p62の欠失によるNF-κBシグナルの抑制がRas誘導性の肺腺がんの形成を抑制することや，恒常的なKrasの活性化によるSQSTM1/p62の発現の亢進が膵管腺がんの発達に関与することが報告されている^71,72)．
　Sqstm1/p62はCullin3型ユビキチンリガーゼのアダプタータンパク質Keap1との相互作用を介して転写因子Nrf2を活性化し，ストレス応答性の遺伝子発現を誘導する³¹⁾（図3b）．このKeap1との結合はmTOR複合体1によるSqstm1/p62のリン酸化により増強される⁷³⁾（新着論文レビュー でも掲載）．重要なことに，肺線がんなどにおいて恒常的にNrf2を活性化しているがん細胞は，ストレス応答性遺伝子のみならず，ペントースリン酸経路-プリンヌクレオチド合成経路やグルタミン代謝を制御する酵素の遺伝子発現も誘導し，これらが腫瘍の増殖をささえている⁷⁴⁾（新着論文レビュー でも掲載）．Sqstm1/p62が蓄積するとNrf2は恒常的に活性化され，その結果，腫瘍細胞の増殖を促進すると考えられる．このことは，肝臓に特異的なAtg7 Sqstm1/p62ダブルノックアウトマウスにおいて，腫瘍の形成が大幅に抑制されることと一致する．これらの事実は，オートファジーの欠損にともなうペルオキシソームや機能不全におちいったミトコンドリアの蓄積による活性酸素種の増加，および，Sqstm1/p62の蓄積によるシグナル伝達の異常が，腫瘍の形成および進行の原因であることを強く示唆する．
　いちじるしく増殖をくり返すがん細胞は十分な血管新生がともなわず，低酸素あるいは低グルコースといった代謝ストレスのもとでの生存を余儀なくされている．また，がん細胞はその増殖を維持するため，アミノ酸，糖質，脂肪酸などをより多く必要とする，すなわち，がん細胞は代謝の要求性がきわめて高い状態にある⁷⁵⁾．オートファジーは腫瘍の形成を抑制する一方，いったん腫瘍化してしまった細胞においては栄養源を供給することにより代謝の要求性をみたしその増殖に貢献している．とくに，約90％にRas遺伝子の変異の認められる膵がんや活性型Rasにより形質転換したがん細胞などでは，オートファジーが恒常的に亢進した“オートファジー依存”の状態になっている^25,76)．このオートファジーの活性化の分子機構はほとんどわかっていないが，オートファジーを阻害すると，膵がんの増殖抑制，異種移植による腫瘍形成の抑制，膵がんマウスモデルの腫瘍の退縮がみられる^25,76)．このようなオートファジーの阻害による腫瘍の抑制効果は，Myc誘導性のリンパ腫やポリオーマウイルス中型T抗原に誘導性の乳腺腫瘍においても認められる^77,78)．
　オートファジーを阻害した膵がん細胞では，活性酸素種の増加，DNA損傷の蓄積，くわえて，おそらくTCA回路中間体の供給の減少による酸化的リン酸化の低下が観察される²⁵⁾．したがって，これらのがん細胞において恒常的に亢進しているオートファジーは，アミノ酸をたえず供給することによりTCA回路中間体の産生を促進するとともに，ミトコンドリアの品質管理によりがん細胞の生存および増殖に寄与していると想定される．しかし，Ras遺伝子のオートファジーへの関与は複雑である．たとえば，Rasの過剰発現により誘導されるオートファジーは，ヒトの卵巣表層上皮細胞においては細胞死を，線維芽細胞においては細胞老化を促進する^76,79,80)．また，一般的にRASの活性化が確認される黒色腫においては，mTOR複合体1の恒常的な活性化によりオートファジーが抑制されているらしい．したがって，黒色腫はアミノ酸プールの減少に応答したオートファジーを誘導できず細胞死をひき起こす⁸¹⁾．種々のがんにおけるオートファジーの生理的な役割は，環境やステージ，そして，遺伝学的な背景により異なるのだろう．事実，最近，p53の欠失の有無により膵がんにおけるオートファジーの役割が異なることが明らかになった⁸²⁾．

おわりに

　オートファジー関連遺伝子の同定をはじめ，オートファジー研究分野における日本人の貢献は大きい．しかし現在，欧米およびアジアの各国ではオートファジーの研究において基礎レベルのみならずトランスレーショナルリサーチも活発に行われており，臨床への応用に関してわが国は後塵を拝している感がある．とくに，がん細胞においてはオートファジーによるアミノ酸の供給やミトコンドリアなどのオルガネラの品質管理がその増殖に決定的であり，既存の抗がん剤とオートファジー阻害剤（正確には，リソソーム酸性化阻害剤）をあわせたがん治療の臨床試験がすでに欧米において開始されている．また，世界中でオートファジーに特異的な活性化剤および阻害剤のスクリーニングが行われ，いくつかは動物レベルでその効果が確認されている．しかし，オートファジーの臨床への応用にはいくつかの問題点が残っている．オートファジーの分子機構には未解明の謎がいまだ山積しており，その阻害あるいは亢進によりどのような副作用があるのかも不透明である．現在まで，オートファジーの活性をモニターできるマーカーもプローブも存在せず，薬効の判定ができない．遺伝子改変動物の解析によりおのおのの組織におけるオートファジーの生理機能の大筋は判明しつつあるが，ヒトの病態におけるその意義はほとんど手つかずの状態であり，さらなる解析が必要であろう．

文 献

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© 2014 蔭山 俊・小松雅明 Licensed under CC 表示 2.1 日本